细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

MTT Cell Proliferation Assay Kit

MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

搜索关键词： 

MTT 噻唑兰；台盼蓝染色法；CCK-8 细胞增殖和毒性检测试剂盒；WST-8；CAS：298-93-1；

基本描述：

噻唑兰（Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, 简称MTT，CAS：298-93-1），也称作溴化噻唑蓝四氮唑，是一种黄色染料，已经广泛替代传统的台盼蓝染色法或者放射性同位素插入法，用来检测细胞活力、细胞增殖以及毒性分析。MTT是一种可接受氢离子的化合物染料，带正电荷，具有细胞膜渗透性。活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能够将外源进入的MTT还原成为水不溶性的蓝紫色MTT-甲臜结晶，而死细胞不具此功能。甲臜结晶不能穿透细胞膜，因此沉积在处于增殖且未受损伤的细胞内。在特定溶剂的作用下*溶解甲臜结晶，然后通过酶标仪测定570 nm附近的吸光度。细胞增殖越多，则吸光度越高；细胞毒性越大，则吸光度越低。

本MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒（MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit）采用*的甲臜溶解液，能够非常好的*甲臜结晶，使检测本底低、灵敏度高，且线性范围宽。

产品组分

注意事项

• 使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发的问题。①由于96孔板周围一圈容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加PBS、无菌水或培养液；②可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方以缓解蒸发。
• MTT溶液在低温下会凝固，请置于室温或20-25℃水浴温育片刻至全部融解后再使用。
• MTT溶液需尽量减少反复冻融的次数，若单次用量很少，建议根据需求分装后置于-20℃保存。MTT溶液颜色如变为灰绿色，请勿使用。

4） 甲臜溶解液当置于-20℃保存需解冻使用，或室温保存产生沉淀，可置于37℃水浴孵育以促进溶解，并且必须全部溶解后混匀使用。

5） 加入甲臜溶解液后请轻轻混匀，但需注意避免产生泡沫。亦可借助显微镜观察甲臜是否*溶解。

6） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法（以96孔板为例）

• 收集对数生长期的细胞，用含血清的培养液配制成单细胞悬液，调整细胞密度，以每孔3000-10,000个细胞接种到96孔板，每孔体积100µl，培养板的边缘孔用无菌PBS填充。设置空白孔和对照孔。

【注①】：通常情况，细胞增殖实验每孔加3000个细胞，细胞毒性实验每孔加6000个细胞。具体每孔所用细胞数目，需根据细胞大小、增殖速度的快慢等来决定。

【注②】：需设置空白孔（不含细胞，含培养液、MTT和甲臜溶解液），对照孔（含细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT和甲臜溶解液），每组设置3个复孔。

• 37℃，5% CO₂继续培养或根据实验具体需求进行培养，一般培养6-24h。
• 根据实验具体需求，给予0-20µl干预药物处理，37℃，5% CO₂继续培养至合适时间。
• 小心吸掉培养液，每孔加入100µl新鲜培养液，再加入10µl MTT溶液（5 mg/ml），加样时尽量勤换枪头，控制加量误差。继续培养4h。
• 小心吸掉培养液，每孔加入110µl 甲臜溶解液，置摇床上低速振荡10min，使得结晶物充分溶解。可在光学显微镜下观察结晶物是否*溶解。如果紫色结晶较小或较少，溶解的时间会短些；如果紫色结晶较大或较多，溶解的时间会长些。
• 在酶标仪上摇匀后，选择570nm，测定吸光度。记录结果，比色以空白调零。

【注①】：对于细胞毒性检测，以未经药物处理细胞的OD值为好的，然后计算药物处理细胞所占的比率（x），公式如下：OD（未经药物处理细胞）/OD（药物处理细胞）好的。然后建立直方图。

相关产品

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

mgm集团检测线路网址是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作，主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本，以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。

细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒