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Y1HGold酵母化学感受态细胞

Y1HGold酵母化学感受态细胞

简要描述:

Y1HGold酵母化学感受态细胞是Clontech GAL4-AbA酵母单杂交系统用的菌株,MATα型,能直接转化质粒进行文库筛选。Y1HGold-GAL4酵母单杂交系统需要两种质粒配套使用,分别为pAbAi和pGADT7。

产品时间:2021-07-14

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Y1HGold Chemically Competent Cell 

酵母菌化学感受态细胞

 

温馨提示

见我司(懋康生物)整理的酵母双杂交(Yeast two-hybrid assay产品专题。

 

产品关键词:

GAL4-AbA酵母单杂交系统Y1HGoldpAbAipGADT7Ar QualX-α-Gal Aureobasidin A AbA);金担子素;

 

产品订购:

货号

产品名称

规格

价格(元)

MF2362-1000UL

Y1HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞

10×100μl

290

MF2362-5000UL

Y1HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞

50×100μl

1320

 

产品组分:

组分编号

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货号(规格)

MF2362-1000UL

MF2362-5000UL

MF2362-A

Y1HGold Competent Cell

-80

10×100μl

50×100μl

MF2362-B

pGADT7 Control Vector (10ng/μl)

-80

10μl  

10μl  

MF2362-C

Carrier DNA (5μg/μl)

-20

100μl 

500μl 

MF2362-D

PEG/LiAC Solution

+4

5ml

25ml

 

产品描述

酵母单杂交是在酵母双杂交的基础上发展起来,不同于双杂交用来研究蛋白-蛋白间的相互作用,单杂交主要用于研究蛋白和DNA的相互作用。

Y1HGoldClontech GAL4-AbA酵母单杂交系统用的菌株,MATα型,能直接转化质粒进行文库筛选。

Y1HGold-GAL4酵母单杂交系统需要两种质粒配套使用,分别为pAbAipGADT7。前者筛选标志为Ura,用于表达pBait-AbAi构建子(通过将bait-DNA 单拷贝或串联重复序列克隆到pAbAi载体所得);后者筛选标志为Leu,用于表达GAL4 AD与诱捕蛋白(prey)的融合蛋白。Y1HGold-GAL4酵母单杂交系统的工作原理在于:基因组整合有pBait-AbAi的酵母报告菌株,当诱捕蛋白(prey)结合到诱饵序列(bait-DNA),GAL4 AD会激活AUR1-C报告基因的表达,这一表达使得细胞能够在含筛选抗生素金担子素(Aureobasidin AAbA)的培养基上生长。与传统的营养缺陷报告基因相比,AUR1-CAbAr)在很低浓度(100-200 ng/ml)下即可以有效杀死非抗性克隆,大大降低背景克隆生长。这一优势也可降低酵母单杂交假阳性发生的概率。

本品为经特殊工艺制备的Y1HGold酵母菌化学感受态细胞,用pGADT7质粒检测转化效率>104cfu/μg DNA。且在-80能稳定保存三个月。

基因型

MATα, ura3-52, his3-200, ade2-101, trp1-901, leu2-3, 112, gal4Δ, gal80Δ, met-, MEL1

使用方法

  1. 100 µl冰上融化的Y1HGold化学感受态细胞,依次加入预冷的目的质粒2-5 µgCarrier DNA 95-100 孵育5 min,快速冰浴。重复一次。)10 µlPEG/LiAc 500µl,用枪吹打几次充分混匀,30水浴30 min(在15min时翻转6-8次混匀)。
  2. 之后将管子放42水浴15 min(在7.5min时翻转6-8次混匀)。
  3. 5000 rpm离心40s弃上清,用400 µl ddH2O重悬沉淀,离心30s弃上清。
  4. 50 µl ddH2O重悬,涂板,放入恒温培养箱29培养48-96 h

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货号

名称

规格

MF2352-1000UL

Y2HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞

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10×100μl

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10×100μl

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10×100μl

MS6303-350G

YPDA Agar Medium YPDA琼脂培养基

350g

MS6304-250G

YPDA Medium YPDA液体培养基

250g

MS6311-467G

Minimal SD Agar Base SD琼脂基础培养基

467g

MS6312-267G

Minimal SD Base SD基础培养基

267g

MS6317-10G

DO Supplement -Leu

10g

MS6320-10G

DO Supplement -His/-Leu

10g

MS6334-10G

DO Supplement -Leu/-Met/-Trp

10g

MS6342-10G

DO Supplement -His/-Leu/-Met/-Trp

10g

MS0002-1ML

Aureobasidin A (AbA) 金担子素A1 mg/ml

1ml

MF2501-200T

Yeast Transformation Kit 酵母转化试剂盒

200T

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

 

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Y1HGold酵母化学感受态细胞

Y1HGold酵母化学感受态细胞

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