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PKH26 Cell Linker Kit 细胞连接试剂盒

PKH26 Cell Linker Kit 细胞连接试剂盒

简要描述:

PKH26 Cell Linker Kit 细胞连接试剂盒:(PKH26 Cell Linker Kit for General Cell Membrane Labeling)是一款基于荧光探针PKH26,用于常规细胞膜标记的检测试剂盒,适用于体外细胞标记,体外细胞增殖以及长期的体内细胞跟踪研究等。

产品时间:2021-07-14

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PKH26细胞连接试剂盒(用于常规细胞膜标记)

 

产品关键词:

PKH26Calcein AM 钙黄绿素PKH67CFDA SEIn vivo cell tracking 体内细胞示踪;Sigma MINI26Phanos Technologies

产品信息

产品名称

产品编号

规格

储存条件

PKH26 Cell Linker Kit for General Cell Membrane Labeling PKH26细胞连接试剂盒(用于常规细胞膜标记)

MX4021-100UL

100μl

2-8ºC避光保存

MX4021-200UL

200μl

2-8ºC避光保存

MX4021-500UL

500μl

2-8ºC避光保存

产品描述

PKH26细胞连接试剂盒(用于常规细胞膜标记)(PKH26 Cell Linker Kit for General Cell Membrane Labeling)是一款基于荧光探针PKH26,用于常规细胞膜标记的检测试剂盒,适用于体外细胞标记,体外细胞增殖以及长期的体内细胞跟踪研究等。

PKH26是一种的膜标记探针,结构上带有一长脂肪族尾巴,能稳定插入细胞膜脂质区域。PKH26荧光处于黄-橙色光谱区间(见图1),大激发波长为551nm,大发射波长是567nm,与罗丹明或PE检测系统兼容。也可能用标准荧光素(Fluorescein)激发滤片,但荧光强度可能会有些降低。PKH26具长的体内半衰期,超过100天,非常适用于体内细胞示踪、细胞增殖研究和其他长期实验。

稀释液CDiluent C)是本试剂盒配套提供的一种水溶性溶液,特别设计的一种标记媒介能维持细胞活力,同时大化染料溶解性和标记过程中的染色效率。Diluent C对哺乳动物细胞来说是等渗的,不含去污剂或有机溶剂,也不含生理盐和缓冲剂。根据细胞类型,染料标记后膜的内在化程度,标记细胞可能呈现不同的状态,从明亮,到均匀点状或斑驳状。然而,PKH26荧光在生理范围内不依赖于pH,且每个细胞的荧光强度通常不受染料位置的影响。

1. PKH26的激发和发射光谱图

我司(懋康生物)提供三种规格的PKH26细胞连接试剂盒(用于常规细胞膜标记),其中:

Mini KitCAT#MX4021-100UL)建议用于小量或初步研究。当使用2ml染色体积(含2μM 终浓度的PKH26),本试剂盒含有足量的染料用于检测25次细胞样本(2×107个细胞/次),和足量的Diluent C用于5次细胞样本(2×107个细胞/次)。用户需根据细胞类型和实验目的来优化确定加的染料浓度。

Midi KitCAT#MX4021-200UL)适用于中量研究。当使用2ml染色体积(含2μM 终浓度的PKH26),本试剂盒含有足量的染料用于检测50次细胞样本(2×107个细胞/次),和足量的Diluent C用于30次细胞样本(2×107个细胞/次)。用户需根据细胞类型和实验目的来优化确定加的染料浓度。

Maxi KitCAT#MX4021-500UL)适用于大量或体内研究。当使用2ml染色体积(含2μM 终浓度的PKH26),本试剂盒含有足量的染料用于检测125次细胞样本(2×107个细胞/次),和足量的Diluent C用于30次细胞样本(2×107个细胞/次)。用户需根据细胞类型和实验目的来优化确定加的染料浓度

产品包装

组分

名称

货号(规格)

MX4021-100UL

MX4021-200UL

MX4021-500UL

MX4021-A

PKH26 Dye (1×10-3 M in EtOH)

1×100μl

2×100μl

5×100μl

MX4021-B

Diluent C

1×10ml

2×30ml

2×30ml

注意事项

1)   PKH26是以溶于乙醇的储存液形式提供,保存的过程中需避光并拧紧盖子,以防止溶液挥发引起的染料浓度提高。使用前需检查是否有结晶,若有结晶,需在37℃水浴溶晶,超声或涡旋直至*溶解。

2)   Diluent C使用前需置于室温回温之后再配制标记用的细胞和染料工作液。Diluent C是无菌溶液,不含任何防腐剂或抗生素,使用和保存过程中都注意无菌。

3)   PKH26不能保存在Diluent C内,保存在Diluent C的染色工作液需在使用前配制,现配现用。

4)   荧光染料均存在淬灭问题,操作和储存过程中需注意避光,以减缓荧光淬灭。

5)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤

一、  自行准备仪器和试剂(试剂盒不提供,用于常规细胞膜标记)

二、  常规细胞膜标记

【注意事项】:

1)   通过分配脂质染料进入细胞膜来进行标记。标记强度是染料浓度和细胞浓度共同作用的一种功能,且不会饱和。因此,用来标记的染料浓度需要有限,过度标记细胞会引起细胞膜完整性丧失和降低的细胞复原能力。

2)   以下步骤适用于体外或离体标记干细胞、淋巴细胞、单个核细胞、内皮细胞、神经元或任何需要将染料插入细胞膜脂质区的其他细胞类型。而体内标记、血小板标记,或在含非吞噬细胞的群体内选择性标记吞噬细胞,需对步骤做适当修改。

3)   需在单克隆抗体染色前进行常规细胞膜染色。4℃单克隆抗体染色过程中膜染料仍能维持稳定。然而,如果单抗标记后再室温下进行常规细胞膜染色,极有可能引起单抗的“盖帽”发生。

4)   以下步骤中用到的细胞和染料浓度是推荐用的起始浓度,广谱适用于各种细胞类型。用户需根据自身细胞类型和实验目的确定加的染料和细胞浓度,通过对染色后细胞活力(比如典化丙啶排斥),荧光强度,染色均匀性和对待研究细胞功能无影响等方面来综合评估。

5)   PKH26染色过程中需避免叠氮化物或代谢毒物的存在。

6)   虽然粘附在固相基质上的贴壁细胞可能被标记,使用单细胞悬浮液能得到更匀质的染色结果。染色前使用蛋白消化酶比如胰酶/EDTA处理贴壁或结合细胞制备成分散的单细胞悬液能得到hao的染色结果。

【染色流程】:

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产品名称

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10mg

 

 

 

 

 

 

 

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

 

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