DirectPCR Lysis Reagent Cell 细胞DNA提取
简要描述：
DirectPCR Lysis Reagent Cell 细胞DNA提取：DirectPCR 不仅介导生物样品的快速裂解，而且含有mgm集团检测线路网址，能够有效抑制PCR扩增用粗提裂解物中存在的抑制效应，同时*保持释放出来的基因组DNA的完整性。
产品时间：2021-07-14
打印当前页DirectPCR Lysis Reagent (Cell) 细胞直接PCR裂解液
【单瓶试剂，细胞裂解+PCR一步到位】
产品关键词：
Viagen Biotech; DirectPCR® 直接PCR；PCR genotyping 基因分型；Proteinase K蛋白酶K；302-C (301-C)；
产品介绍：
Viagen DirectPCR® DNA Extraction System（DirectPCR® DNA提取系统）是一种单管系统，用于从小鼠尾巴，耳片，卵黄囊和培养细胞内快递制备DNA。Viagen Biotech, Inc科学家开发的组分（正在申请）允许用DirectPCR® DNA Extraction System获得的DNA提取物与基因分型用的基因组PCR兼容。生物样本的粗提物与许多分子生物学级的试剂比如PCR都难以兼容，部分原因在于粗提物内含有mgm集团检测线路网址。DirectPCR®不仅介导生物样品的快速裂解，而且含有mgm集团检测线路网址，能够有效抑制PCR扩增用粗提裂解物中存在的抑制效应，同时zui大程度保持释放出来的基因组DNA的完整性。申请中的DirectPCR®操作起来，*消除任何溶液转移或开管步骤，根本上节省了大量时间和精力。
产品特点：
1） 省时：更少的动手时间；尾巴裂解液粗提物即可用于PCR；
2） 省钱：仅需成本的反应流程；
3） 安全：无有机试剂；
4） 环保：更少消耗（有机试剂，管子，枪头等等）
5） 可靠有效：100%成功率保证高产量
详细流程：
1） 10cm细胞培养板细胞，使用添加新鲜制备的0.2-0.4mg/ml蛋白酶K的200-300μl DirectPCR® Lysis Reagent (Cell) 细胞裂解液重悬细胞。蛋白酶K在DirectPCR®中稳定保存~24h。如果处理少量细胞，会很难称量蛋白酶K酚末，可直接使用Viagen提供的基因组PCR级的蛋白酶K溶液（Cat#501-PK），使用浓度为0.5-1.0mg/ml（每1ml DirectPCR®中加入25-50μl蛋白酶K溶液）。【注意】：若使用小量细胞，可用去离子水稀释DirectPCR®高达10倍，然后使用合适更多体积的裂解液用于PCR。见表1，DirectPCR® Lysis Reagent (Cell) 起始使用条件。
2） 置于旋转杂交炉中，55℃转动管子处理5-6h或直到看不见组织团。若有必要，能过夜裂解样本，不会影响效率。*裂解至关重要。要想获得更具有重复性的结果，中途摇动一下瓶子以更换管子的位置一次，在处理2-3h之后。
3） 水浴锅内85℃孵育粗提液45min。【可选】于步骤4）前离心10s沉淀毛发。粗提液可置于-20℃保存1年（或4℃保存1周），不会降低效率。
4） 每50μl PCR反应体系加入0.5-1.0μl裂解液。推荐PCR用Qiage Hotstar Taq DNA polymerase或Sigma JumpStart Taq DNA polymerase。
表1，DirectPCR® Lysis Reagent (Cell)起始使用条件。
plate (# cells) | Tube size (ml) | DirectPCR-Cell (μl) | Dilution (fold) | Lysates (μl)/50μl PCR rxn |
96 well* | 0.75 | 50-70 | 1 | 1-1.5 |
96 well** | 0.75 | 60-80 | 2 | 2-3 |
24 well* | 0.75 | 70-100 | 1 | 1-1.5 |
6 well* | 0.75 | 100-140 | 1 | 1-1.5 |
10cm* | 1.5ml | 200-300 | 1 | 1-1.5 |
* Lysis using rotation hybridization oven.
** Lysis using rocking plate. Wash cells in 96-well plate twice with phosphate buffered saline and add 60 µl DirectPCR Reagent (Cell), which has been 2-fold diluted. Incubate at 55°C overnight. Place the 96-well plate in the wet chamber and float the chamber on the 85°C water bath for 1.5 hrs. Pipette up and down several times. Take 1 µl of lysates for PCR.
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品牌 | 名称 | 货号 | 规格 |
Viagen Biotech | DirectPCR Lysis Reagent (Cell) | 301-C | 50ml |
Viagen Biotech | DirectPCR Lysis Reagent (Cell)) | 302-C | 100ml |
Viagen Biotech | Genomic PCR Grade Proteinase K Solution | 501-PK | 5ml |
DirectPCR Lysis Reagent (Cell) Protocol Manual
— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
mgm集团检测线路网址是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作，主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本，以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。
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