Stbl3化学感受态细胞（不稳定DNA转化）

Stbl3 Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞

产品标签：

Stbl3；Stbl2；HB101；Stable；Direct repeats 直接重复片段；Lentiviral expression vectors 慢病毒表达载体；In-fusion 一步法克隆检测试剂盒；

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产品组分：

菌株描述

Stbl3菌株来源于大肠杆菌HB101菌株，特别适用于克隆不稳定插入片段比如含有直接重复序列的慢病毒DNA。与*0菌株不同，Stbl3菌株减少了存在于慢病毒表达载体和一些其他腺病毒载体中长末端重复序列（LTRs）的同源重组频率，有效降低错误重组。Stbl3有更高的基因组克隆容量。此菌株含链霉素抗性。

Stbl3菌株基因型：F-mcrB mrrhsdS20(rB-, mB-) recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(StrR) xyl-5 λ-leumtl-1

产品描述

本品是Stbl3菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。经pUC19质粒检测转化效率＞10⁸ cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。

注意事项

1）   对不稳定DNA克隆或逆转录病毒/慢病毒载体克隆，涂板后应在30℃培养，以减少错误重组的发生概率。

2）   制备高纯度病毒质粒，需使用新鲜转化的平板接菌，新鲜菌液提取质粒，菌液不可低温保存后使用。

3）   对不稳定的克隆或病毒质粒优先以质粒状态保存，尽量避免以转化在大肠杆菌细胞的方式保存质粒。

4）   转化时SOC或LB培养基均可用，前者能提高转化效率约20%。

5）   感受态细胞必须用干冰运输。感受态细胞应在-80℃保存，不可反复冻融且放置时间过长，否则会减低感受态细胞的转化效率。

6）   醉好在冰上融化感受态细胞。

7）   进行转化操作时，需在相应温度及无菌条件下进行。

8）   为防止转化实验不成功，可保留部分连接反应液以重新转化，将损失降到zui低。

9）   产品包装内含质粒pUC19 DNA(10 pg/μl)，供对照实验用。

10）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

Stbl3感受态细胞常见问题【详细问题请见懋康网站MKbio介绍】

1.      使用Stbl3感受态细胞时，如何提高病毒质粒的产量？

2.      是否能用*0或DH5α代替Stable或Stbl3扩繁病毒质粒？

3.        使用Stbl3，*0感受态细胞构建或扩增病毒质粒时，平板上长出的克隆有的偏大，有的偏小，如何选择哪种克隆用于后续实验？

4.      Stbl3的基因型为F-mcrB mrrhsdS20(rB-, mB-) recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20 (StrR) xyl-5 λ-leu mtl-1，如何理解各个基因？

5.      转化过程中感受态细胞的复苏必须使用SOC培养基？

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

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Stbl3化学感受态细胞（不稳定DNA转化）

Stbl3化学感受态细胞（不稳定DNA转化）