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D-Luciferin Firefly D-荧光素(钠盐/钾盐/游离酸)

D-Luciferin Firefly D-荧光素(钠盐/钾盐/游离酸)

简要描述:

D-Luciferin Firefly D-荧光素(钠盐/钾盐/游离酸)应用:常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。目前市场上有三种产品形式,D-荧光素(游离酸),D-荧光素(钠盐),和D-荧光素(钾盐)。

产品时间:2021-10-27

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D-Luciferin Firefly D-荧光素(钠盐/钾盐/游离酸)注意事项

1)萤火虫荧光素(firefly luciferin)和甲虫荧光素(beetle luciferin)皆相同化合物,即:(S)-2-(6-Hydroxy-2- benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-carboxylic acid,仅不同公司在命名上的差异。

2)萤火虫荧光素(firefly luciferin)在保存和操作的过程中需要避光。另,水溶性储存液经过滤除菌后,可置于-20℃或-80℃分装冻存,避免反复冻融。若条件允许,对储存液充氮气或氩气(防止氧化),稳定性和保存时间更长,长达1年。

3)萤火虫荧光素(firefly luciferin)的注射方式,以及动物类型、体重等都会影响荧光信号发射,建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线,确定zuijia信号平台期和zuijia检测时间。

4)紫外线和潮气会产生脱氢荧光素,是一种荧光素酶的竞争性mgm集团检测线路网址。因此需小心保存和处理D-荧光素。-20℃避光干燥保存。

5)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

D-Luciferin Firefly D-荧光素(钠盐/钾盐/游离酸)使用方法

A.体外生物发光检测

1. 储存液制备

【注意】:建议大量实验前先取少量原料(D-荧光素游离酸)溶于你的缓冲液,以测试其溶解性。

【配置方法】:要溶解萤火虫荧光素游离酸到生理盐中,首先用NaOH或KOH调整缓冲液到预测的摩尔碱度,然后加入D-荧光素游离酸(如15mg/ml),边搅拌边促进溶解。如果仍有沉淀,调整pH到更高直至*溶解。zui后用酸调整pH到所需值。混匀后立即使用或分装于-80℃避光冻存,避免反复冻融。

2. 荧光素酶反应缓冲液制备

2.1 配方【1×,参考Yuichi Oba, et al., 2003】:100mM Tris-HCl(pH 7.8),5mM MgCl2,250µM CoA,150µM ATP。具体缓冲液组成可参考其他文献资料来调整。按照以上配方制备荧光素酶反应缓冲液(2×)。

3. 收集细胞裂解上清(荧光素酶表达)

根据需要检测的细胞类型,选择合适的裂解液进行细胞裂解,离心收集上清后续检测待用。

4. 萤火虫荧光信号检测

【注①】:萤火虫荧光信号的检测方法大体上取决于冷光测定仪(luminometer)类型(是手动型荧光计、单管注射型或者酶标板读数型荧光计)。根据特定发光测定仪,来考虑注射用量和程序设置。

【注②】:需设置不含荧光素酶的孔(用作阴性对照),以测定背景荧光。

例:注射式冷光测定仪(injectible luminometer,单样或微孔板,200µl终体积)

a)吸取100µl荧光素酶反应缓冲液(2×)到一干净的冷光测定仪比色皿或96孔板的各孔(使用全白平底的96孔板);

b)吸取50~98µl裂解上清到皿或孔内;

c)如果有需要,用水来补足使得总体积到198µl;

d)设置程序注射2µl荧光素储存液(使工作浓度150µg/ml),程序:2~5秒延迟(delay),之后10s测定。

 

B.活体成像分析

1)工作液准备:准备少量的PBS(w/o Mg2+), pH=12以及PBS(w/o Mg2+), pH=2缓冲液。先取10mg D-荧光素游离酸到165ml PBS(w/o Mg2+), pH=12,充分溶解后,再加入165ml PBS(w/o Mg2+), pH=2中和溶液,混匀得到30mg/ml的工作液。0.2µm滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-80℃避光冻存,避免反复冻融。一旦使用,放到4℃解冻,保持冰冷且避光。

2)注射方式:适用于静脉注射,腹腔注射,肌肉注射和鼻内注射等,根据具体方式调整注射体积,zui常用的注射浓度为150mg/kg体重。

3)检测方式:注射入体内10-20 min(待光信号达到zui强稳定平台期),再进行成像分析。

【注意】:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定zui高信号检测时间和信号平台期。

 

货号

产品名称

规格

价格(元)    

MX4601-250MG       

D-Luciferin Firefly, Free Acid D-萤火虫荧光素(游离酸)   

250mg        

1800

MX4601-500MG

D-Luciferin Firefly, Free Acid D-萤火虫荧光素(游离酸)

500mg

3000

MX4601-1000MG

D-Luciferin Firefly, Free Acid D-萤火虫荧光素(游离酸)

1g

5800

 

相关产品:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,: 。:www.maokangbio。。com。

货号

产品名称

规格            

价格(元)    

MX4602-100MG

D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素(钠盐)

100mg

998

MX4602-500MG       

D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素(钠盐)

500mg

2500

MX4602-1G

D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素(钠盐)

1g

4500

MX4603-100MG

D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光素(钾盐)                 

100mg

998

MX4603-500MG

D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光素(钾盐)

500mg

2500

MX4603-1G

D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光素(钾盐)

1g

4500

MX4604-10MG

DMNPE-caged Luciferin D-荧光素(DMNPE笼闭)       

10mg

1350

MX4604-50MG

DMNPE-caged Luciferin D-荧光素(DMNPE笼闭)

50mg

5440

 

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

D-Luciferin Firefly, Free Acid D-萤火虫荧光素(游离酸)

 

搜索关键词:

D-荧光素(D-Luciferin);Luc报告基因底物;萤火虫荧光素酶Firefly luciferase;D-荧光素钾盐;D-荧光素钠盐;生物发光成像技术(Bioluminescence imaging,BLI);Luminometer荧光计;CAS NO:2591-17-5;

 

描述:

D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,D-荧光素(底物)被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染进入细胞后,导入研究动物如大小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

这三种产品主要差别在于溶解特性。D-荧光素(游离酸)在水以及缓冲体系内的溶解性都很弱,除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50 mg/ml)。但钠盐和钾盐形式的D-荧光素能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的三种产品,在绝大多数应用上都没有实质性的差别。

 

基本特性:

1)  CAS NO:2591-17-5

2)  化学名:(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid; D-Luciferin Firefly, free acid D-萤火虫荧光素游离酸,D-甲虫荧光素游离酸;

3)  分子式:C11H8N2O3S2

4)  分子量:280.32 g/mol

5)  纯度:>99% (HPLC)

6)  外观:类白色至浅黄色粉末

7)  溶解性:溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50mg/ml),溶于弱碱,微溶于水

8)  化学结构图:

 

D-Luciferin Firefly Free Acid D-荧光素游离酸 荧光探针与细胞染色

D-Luciferin Firefly Free Acid D-荧光素游离酸 荧光探针与细胞染色

D-Luciferin Firefly Free Acid D-荧光素游离酸 荧光探针与细胞染色

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