Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit 酵母转化试剂盒 克隆与表
简要描述：
Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit 酵母转化试剂盒 克隆与表达分析，是一款专门设计用于酵母转化和文库筛选的试剂盒，比目前商业或公开的文献方法更快捷和更有效。本试剂盒制备的酵母细胞可立即用于转化或冻存待用（≤ -70°C）。
产品时间：2017-09-02
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Frozen-EZ酵母转化试剂盒
【温馨提示】：
见我司懋康生物整理的酵母双杂交检测（Yeast two-hybrid assay）产品专题。
基本描述
Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™（酵母转化试剂盒）是一款专门设计用于酵母转化和文库筛选的试剂盒，比目前商业或公开的文献方法更快捷和更有效。本试剂盒制备的酵母细胞可立即用于转化或冻存待用（≤ -70°C）。本试剂盒制备的细胞适用于环形和线性DNAs转化，同时也能用于其他真菌包括C. albicans，S. pombe和P. pastoris的转化。
产品亮点：
- 高转化效率：每µg质粒DNA（环形）可产生105 - 106个酵母转化子；
- 制备好的感受态细胞可冻存后待用；
- 快速简单步骤于10min内可制备酵母感受态细胞；
- 简单单一步骤，1h内完成转化；
- 适用菌株类型广（S. cerevisiae, C. albicans, S. pombe, Pichia pastoris）；
- 简单方法用于多质粒转化；
产品组分：本试剂盒可做120个常规转化或600个微量转化实验。试剂盒4℃一年有效。
组分 | 规格 | 保存 |
EZ1 Solution | 60ml | 0-4℃ |
EZ2 Solution | 6ml | 0-4℃ |
EZ3 Solution | 60ml | 0-4℃ |
操作流程【见下图】：
A，感受态细胞制备
30℃，于10ml YPD肉汤培养酵母菌直至中数量级（~5 x 106-2 x107 cells/ml 或OD600= 0.8-1.0）。以下步骤室温进行。
A1，500 x g离心细胞4min，吸掉上清液；
A2，加入10ml EZ1溶液清洗沉淀。重新离心沉淀细胞，吸掉上清液；
A3，加入1ml EZ2溶液重悬沉淀细胞。
此时获得的感受态细胞即可直接用于转化或冻存备用（≤ -70°C）。注意需缓慢冻存细胞，不可使用液氮瞬间冻存细胞。
B，转化
以下步骤适用于新鲜制备和冻存（室温融化）的酵母感受态细胞。
B1，取50µl感受态细胞与0.2-1µg DNA（体积少于5µl）混合；加入500µl EZ3溶液，*混合；
B2，30°C孵育45min，孵育过程中用手指轻弹或低速涡旋（如果适用于转化DNA）2-3次让其混匀；
B3，从上面转化混合液中取50-150µl到适当平板上，没有必要沉淀或清洗细胞。、
B4，30°C孵育平板2-4天使得转化子生长。
订购信息：Zymo Research原装正品，现货供应。咨询，，：。
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格（元） |
T2001 | Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™（酵母转化试剂盒） | 120 Rxns | 咨询 |
T2001 Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™ User Manual
引用文献：
Plasmids were transformed with high efficiency using the Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™ in the construction of synthetic yeast promoters. Researchers showed that decreasing nucleosome affinity correlated with increasing promoter strength and expression levels higher than native species. |
Curran KA, et. al. (2014) Design of synthetic yeast promoters via tuning of nucleosome architecture. Nat Commun. 5:4002. |
The Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit was used to integrate various TEF1 promoter mutants upstream of a gene in Saccharomyces cerevisiae. Efficient transformation allowed comparison of gene activity and, therefore, determination of promoter strength. |
Nevoigt, E., et al. (2006) Engineering of promoter replacement cassettes for fine-tuning of gene expression in Saccharomyces cerevisiae. Appl Environ Microb, 72(8): 5266-5273. |
— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
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Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit 酵母转化试剂盒 克隆与表达分析
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