Hydroxyphenyl fluorescein

Hydroxyphenyl fluorescein (HPF) 羟苯基荧光素

产品关键词

APF 氨基苯基荧光素；HPF羟苯基荧光素；H2DCFDA；Reactive oxygen species (ROS)；Hydroxyl radical

羟基（HO•）；CAS NO. 359010-69-8；

产品信息

产品描述

氨基苯基荧光素（APF）和羟苯基荧光素（HPF）是由T. Nagano开发的两种活性氧（Reactive oxygen species, ROS）指示剂，比H₂DCFDA（DCFH-DA, DCFH）具更优秀的特异性和稳定性。APF和HPF显示有限的非选择性反应，和相对较高的光诱导氧化抗性。APF和HPF具细胞膜渗透性，本身无荧光，直到与羟基自由基或过氧亚硝基阴离子反应，还能与次氯酸阴离子反应，产生强绿色荧光（Ex/Em，~490/515nm），可用荧光显微镜、高通量成像仪、荧光酶标板或流式细胞仪检测。

本品以粉末形式提供，可直接溶于无水DMSO配制成10mM储存液，常用工作浓度范围1-10μM，需根据自身的实验体系或参考文献进行优化。

产品特性

1. CAS NO.：359010-69-8
2. 同义名：3'-p-(hydroxyphenyl) fluorescein (HPF) 羟苯基荧光素
3. 分子式：C₂₆H₁₆O₆
4. 分子量：424.41
5. 纯度：≥95%
6. Ex/Em：492/515nm
7. 溶解性：溶于DMSO（10mM）、DMF（5mM）
8. 化学结构：

使用方法

以下实验步骤仅做参考，需根据实际需求进行调整。在加入HPF工作液之前按需处理细胞。

1. 将低温保存的粉末置于室温回温至少20min，之后加入适量无水DMSO配置成10-20mM储存液。按照单次用量分装，-20ºC避光保存，避免反复冻融。
2. 根据具体用量，将DMSO储存液用HHBS缓冲液或其他生理缓冲液稀释成1-10μM工作液。
3. 根据实验设计处理细胞（比如，RASM细胞用50-100nM 血管紧张素II处理3-5h）。
4. 取步骤2）准备的1-10μM工作液加入细胞，37ºC孵育20-60min。
5. 吸掉染色工作液，用HHBS或其他生理缓冲液替换。
6. 用合适的荧光仪器（Ex/Em=492/515nm）来检测。

【注1】：BSA和酚红会影响荧光，需谨慎使用。

【注2】：APF和HPF能用于溶液体系或胞内ROS检测。

注意事项

1. APF和HPF仅用于科研研究，不可用于体外诊断研究。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

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